對畜禽行業(yè)來說，白血病的爆發(fā)不啻于一場“浩劫”：我國花巨資購入的艾維因品系白羽肉種雞此前本已實現(xiàn)了自繁自養(yǎng)，但因感染禽白血病而完全退出市場，從此完全依賴進口；更嚴重的是，國內(nèi)自繁自養(yǎng)的蛋雞、黃羽肉雞等原種雞群也大批量感染了禽白血病；甚至在發(fā)病高峰期，每年至少有6千萬只商品代蛋雞死亡，涉及國內(nèi)三分之二種雞公司的后代，年損失約45億元。
形勢逆轉(zhuǎn)是從一種被稱為“克星”的新技術(shù)開始的。科技日報記者近日走入河北大午農(nóng)牧集團種禽有限公司雞舍，和總經(jīng)理劉平聊起了這個企業(yè)與禽白血病的“戰(zhàn)斗”過程?！艾F(xiàn)在有了禽白血病診斷和凈化技術(shù)，禽白血病病毒在經(jīng)營的蛋雞原種雞群中實現(xiàn)了徹底凈化，再也不用擔驚受怕了?！眲⑵介_心地說。
這項由山東農(nóng)業(yè)大學(xué)自主研發(fā)的禽白血病診斷和凈化技術(shù)，現(xiàn)已應(yīng)用于眾多養(yǎng)殖企業(yè)，從源頭切斷了疾病的傳播。目前，該診斷檢測技術(shù)被中國農(nóng)業(yè)大學(xué)、中國農(nóng)科院、農(nóng)業(yè)部獸醫(yī)診斷中心等從事禽白血病研究的高校和科研機構(gòu)采用，通過檢疫切斷白血病傳播的防控模式在我國65%的祖代白羽肉雞和60%的祖代蛋雞中推廣應(yīng)用，取得了巨大的經(jīng)濟社會效益。
找出發(fā)病“元兇”
“美國多年前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了禽白血病，我國的白羽肉雞幾乎都由美國進口。當時我們就判斷，我國的白羽雞得的病可能就是禽白血病?！鄙綎|農(nóng)業(yè)大學(xué)崔治中教授表示。
事實證明，崔治中的推斷是正確的。崔治中團隊在我國白羽肉雞中率先分離鑒定了J亞群禽白血病病毒（以下簡稱J病毒），并找到了有關(guān)基因組上可追溯來源的分子標志，證實了該病毒來自美國。這也讓國內(nèi)有關(guān)公司的種禽國際貿(mào)易糾紛談判有了科學(xué)依據(jù)。
經(jīng)過深入研究，團隊還發(fā)現(xiàn)J病毒是我國雞群白血病的主要病因。在發(fā)病嚴重的年份，我國所有白羽快大型肉雞群普遍發(fā)生J病毒感染，并且約70%市場份額的蛋雞種業(yè)公司被投訴。
針對該病毒的傳播原理，崔治中向記者科普道，橫向傳播，指病毒在人群中不同個體間的傳播，在特定條件下也可直接進入血循環(huán)；垂直傳播，指通過胎*或產(chǎn)道，病毒直接由親代傳播給子代的方式，“而禽白血病是由禽白血病病毒（ALV）引起的腫瘤病，以垂直傳播為主，但又能橫向傳播，也就是種雞感染禽白血病后會傳給數(shù)量巨大的商品代雛雞，又能在孵化期時橫向傳播給其他剛出殼的小雞。按照理論，一只曾祖代雞能產(chǎn)出24萬只商品雞，也就是如果一只曾祖代種雞感染，會造成數(shù)萬只商品雞感染，經(jīng)濟損失可想而知?！泵鎸@一重疫病，崔治中和團隊人員憂心忡忡。
為此，崔治中團隊連續(xù)多年收集保存各亞群禽白血病病毒共200余株，建立了系統(tǒng)完善的資源庫，由此也創(chuàng)新性地揭示了我國J病毒的分子演變規(guī)律，“翻出”了禽白血病病毒的“家底”。
堵住病毒“進口”
找到元兇，下一步就是控制，但我國的曾祖代或者祖代種雞幾乎都從國外進口，如何通過對進口種雞進行檢測以從源頭上避免帶進J病毒？“在當時，全世界都沒有針對這個新型病毒的檢測試劑?！贝拗沃懈袊@道。
模擬抗原是*一道難關(guān)，正當團隊一籌莫展時，另一種病毒吸引了科研人的視線?！爱敃r昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)剛剛興起，因為其所表達的蛋白含量高，且它作為真核表達系統(tǒng)能更好的模擬抗原。”崔治中說，通過該病毒表達系統(tǒng)為載體，很快表達出了J病毒的抗原蛋白，“緊接著，我們研制出了針對該病毒的單克隆抗體，并利用這一單克隆抗體在熒光顯微鏡下觀察到病毒的存在，建立了可用于檢測J病毒的間接免疫熒光檢測方法?！?/span>
間接免疫熒光檢測方法現(xiàn)在是一種非常常規(guī)的檢測方法，“但當時在獸醫(yī)學(xué)的應(yīng)用較少?！眻F隊成員趙鵬對檢測方法過程科普道，我們檢測時在所取樣品中加入針對J病毒的單克隆抗體，而這種抗體只會與J病毒結(jié)合，然后再加入熒光素標記物，如果抗體已與病毒結(jié)合，則在專用熒光顯微鏡下就能看到病毒感染部位發(fā)出紅色或綠色的熒光，若沒有結(jié)合就不會看到光亮，由此判定細胞中是否存在病毒感染。整個過程簡單、易操作。
在實踐中，新的診斷技術(shù)也讓國內(nèi)禽類企業(yè)如虎添翼的同時，保證了雞禽的質(zhì)量。
北京愛拔益加家禽育種有限公司等四家公司此前一直從國外進口AA、ROSS品系祖代肉雞種苗，在意識到了禽白血病病毒危害的嚴重性后，運用間接免疫熒光檢測方法，在堵住禽白血病從國外到國內(nèi)的“進口”的同時，這三家公司的種雞群很快就實現(xiàn)了禽白血病“零發(fā)生”。直到現(xiàn)在這些企業(yè)仍然是國內(nèi)種禽行業(yè)的龍頭企業(yè)。
凈化國內(nèi)“土著雞”
禽白血病“進口”堵住了。然而之前隨進口種雞帶入的該禽白血病病毒，已傳進了我國幾乎所有自繁自養(yǎng)的蛋雞和黃羽肉雞等原種雞群。在沒有有效藥物或疫苗情況下，如何在這些“土著”雞群中快速、徹底凈化禽白血病病毒？
考慮到該病毒垂直傳播的特點，研究團隊打算通過對種雞群進行檢測后淘汰帶毒病雞的方式進行凈化。然而，在家禽的哪個生長階段檢測？取雞體中的什么樣品？這些又成為在研究中必須攻克的“山頭”。
適合我國原種雞場的禽白血病凈化集成規(guī)程此時出現(xiàn)了，解決了上述難題。該方法可在種雞生長的幾個關(guān)鍵期進行病毒檢測后，徹底淘汰帶禽白血病病毒的雞。規(guī)程中的檢測樣品包括：在種蛋孵化出殼時，技術(shù)人員采集所有雛雞胎糞；在育雛后期，采集所有雞的血液；在開產(chǎn)初期和留種前，采集所有雞的血液和公雞精液。
“由于種蛋出殼時的雛雞*易感染病毒，病毒可能會橫向感染其他剛出殼的雛雞，想徹底清除病毒樣本必須檢測胎糞。”趙鵬表示，除此之外，還因為“胎糞檢測結(jié)果不僅可以反映這只雞的感染狀態(tài)，還能盡量減少對雛雞的應(yīng)激。從雞出殼8至10周齡時為育雛期，這個時期需要較高的溫度和營養(yǎng)，要飼養(yǎng)在專門的育雛舍中，應(yīng)激反應(yīng)越小越好?！?/span>
*后，為了防止漏檢，在種雞育雛后期由育雛舍轉(zhuǎn)入育成舍時還要檢測，不把病毒帶入新雞舍，在開產(chǎn)初期和留種前，也就是雞要“生孩子”時再進行*后把關(guān)。
打破誤區(qū)，做到“不留死角”
此前國際禽病界和家禽育種公司一直認為由于精子的自我校正機制等原因，禽白血病病毒并不感染精子，而公雞和母雞直接接觸才會傳染，認為在生產(chǎn)中普遍采用人工授精的方式，不會造成禽白血病的感染。“我們證明了種公雞可經(jīng)精液將病毒傳染給母雞，并由此垂直傳播至下一代?！壁w鵬說。
“在實施禽白血病凈化過程中發(fā)現(xiàn)，用感染禽白血病的公雞精液為正常母雞人工授精后，其后代群體中仍有禽白血病感染現(xiàn)象的發(fā)生?！贝拗沃姓f，由此我們開始懷疑公雞的精液是否也會將禽白血病病毒傳染給母雞？
一系列試驗立刻進行，通過給雞胚靜脈接種J病毒，待其孵化后找到感染病毒的公雞，再等它們性成熟后采集精液給母雞做人工授精，*后檢測母雞是否感染，并將該母雞產(chǎn)的蛋孵化小雞，對其進行病毒分離，結(jié)果顯示，這種方式孵化出的小雞體內(nèi)也可以檢測出禽白血病病毒?！熬褐械某煞质呛軓?fù)雜的，精子只是其中一小部分，精子不感染病毒不代表精液中沒有病毒?！壁w鵬表示，試驗數(shù)據(jù)證實了他們的懷疑是正確的，并進一步挖掘出新的“真相”：公雞即使血液中沒有檢測到禽白血病病毒，但精液中卻仍可以檢測到這個病毒。新出爐的對公雞精液實施病毒分離檢測的*佳操作流程在眾多雞禽類企業(yè)試驗后，數(shù)據(jù)顯示雞群的禽白血病感染率進一步下降。
“過去國際上一直忽略公雞在禽白血病傳播中的作用，漏檢了很多帶病種公雞，所以西方國家需用7至10年甚至更長的時間才能完成凈化。而運用了新技術(shù)，只需3至5年就能徹底凈化原種雞場內(nèi)的禽白血病毒?！壁w鵬表示。
這也讓國內(nèi)原種雞群禽白血病病毒凈化“不留死角”。
形勢逆轉(zhuǎn)是從一種被稱為“克星”的新技術(shù)開始的。科技日報記者近日走入河北大午農(nóng)牧集團種禽有限公司雞舍，和總經(jīng)理劉平聊起了這個企業(yè)與禽白血病的“戰(zhàn)斗”過程?！艾F(xiàn)在有了禽白血病診斷和凈化技術(shù)，禽白血病病毒在經(jīng)營的蛋雞原種雞群中實現(xiàn)了徹底凈化，再也不用擔驚受怕了?！眲⑵介_心地說。
這項由山東農(nóng)業(yè)大學(xué)自主研發(fā)的禽白血病診斷和凈化技術(shù)，現(xiàn)已應(yīng)用于眾多養(yǎng)殖企業(yè)，從源頭切斷了疾病的傳播。目前，該診斷檢測技術(shù)被中國農(nóng)業(yè)大學(xué)、中國農(nóng)科院、農(nóng)業(yè)部獸醫(yī)診斷中心等從事禽白血病研究的高校和科研機構(gòu)采用，通過檢疫切斷白血病傳播的防控模式在我國65%的祖代白羽肉雞和60%的祖代蛋雞中推廣應(yīng)用，取得了巨大的經(jīng)濟社會效益。
找出發(fā)病“元兇”
“美國多年前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了禽白血病，我國的白羽肉雞幾乎都由美國進口。當時我們就判斷，我國的白羽雞得的病可能就是禽白血病?！鄙綎|農(nóng)業(yè)大學(xué)崔治中教授表示。
事實證明，崔治中的推斷是正確的。崔治中團隊在我國白羽肉雞中率先分離鑒定了J亞群禽白血病病毒（以下簡稱J病毒），并找到了有關(guān)基因組上可追溯來源的分子標志，證實了該病毒來自美國。這也讓國內(nèi)有關(guān)公司的種禽國際貿(mào)易糾紛談判有了科學(xué)依據(jù)。
經(jīng)過深入研究，團隊還發(fā)現(xiàn)J病毒是我國雞群白血病的主要病因。在發(fā)病嚴重的年份，我國所有白羽快大型肉雞群普遍發(fā)生J病毒感染，并且約70%市場份額的蛋雞種業(yè)公司被投訴。
針對該病毒的傳播原理，崔治中向記者科普道，橫向傳播，指病毒在人群中不同個體間的傳播，在特定條件下也可直接進入血循環(huán)；垂直傳播，指通過胎*或產(chǎn)道，病毒直接由親代傳播給子代的方式，“而禽白血病是由禽白血病病毒（ALV）引起的腫瘤病，以垂直傳播為主，但又能橫向傳播，也就是種雞感染禽白血病后會傳給數(shù)量巨大的商品代雛雞，又能在孵化期時橫向傳播給其他剛出殼的小雞。按照理論，一只曾祖代雞能產(chǎn)出24萬只商品雞，也就是如果一只曾祖代種雞感染，會造成數(shù)萬只商品雞感染，經(jīng)濟損失可想而知?！泵鎸@一重疫病，崔治中和團隊人員憂心忡忡。
為此，崔治中團隊連續(xù)多年收集保存各亞群禽白血病病毒共200余株，建立了系統(tǒng)完善的資源庫，由此也創(chuàng)新性地揭示了我國J病毒的分子演變規(guī)律，“翻出”了禽白血病病毒的“家底”。
堵住病毒“進口”
找到元兇，下一步就是控制，但我國的曾祖代或者祖代種雞幾乎都從國外進口，如何通過對進口種雞進行檢測以從源頭上避免帶進J病毒？“在當時，全世界都沒有針對這個新型病毒的檢測試劑?！贝拗沃懈袊@道。
模擬抗原是*一道難關(guān)，正當團隊一籌莫展時，另一種病毒吸引了科研人的視線?！爱敃r昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)剛剛興起，因為其所表達的蛋白含量高，且它作為真核表達系統(tǒng)能更好的模擬抗原。”崔治中說，通過該病毒表達系統(tǒng)為載體，很快表達出了J病毒的抗原蛋白，“緊接著，我們研制出了針對該病毒的單克隆抗體，并利用這一單克隆抗體在熒光顯微鏡下觀察到病毒的存在，建立了可用于檢測J病毒的間接免疫熒光檢測方法?！?/span>
間接免疫熒光檢測方法現(xiàn)在是一種非常常規(guī)的檢測方法，“但當時在獸醫(yī)學(xué)的應(yīng)用較少?！眻F隊成員趙鵬對檢測方法過程科普道，我們檢測時在所取樣品中加入針對J病毒的單克隆抗體，而這種抗體只會與J病毒結(jié)合，然后再加入熒光素標記物，如果抗體已與病毒結(jié)合，則在專用熒光顯微鏡下就能看到病毒感染部位發(fā)出紅色或綠色的熒光，若沒有結(jié)合就不會看到光亮，由此判定細胞中是否存在病毒感染。整個過程簡單、易操作。
在實踐中，新的診斷技術(shù)也讓國內(nèi)禽類企業(yè)如虎添翼的同時，保證了雞禽的質(zhì)量。
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凈化國內(nèi)“土著雞”
禽白血病“進口”堵住了。然而之前隨進口種雞帶入的該禽白血病病毒，已傳進了我國幾乎所有自繁自養(yǎng)的蛋雞和黃羽肉雞等原種雞群。在沒有有效藥物或疫苗情況下，如何在這些“土著”雞群中快速、徹底凈化禽白血病病毒？
考慮到該病毒垂直傳播的特點，研究團隊打算通過對種雞群進行檢測后淘汰帶毒病雞的方式進行凈化。然而，在家禽的哪個生長階段檢測？取雞體中的什么樣品？這些又成為在研究中必須攻克的“山頭”。
適合我國原種雞場的禽白血病凈化集成規(guī)程此時出現(xiàn)了，解決了上述難題。該方法可在種雞生長的幾個關(guān)鍵期進行病毒檢測后，徹底淘汰帶禽白血病病毒的雞。規(guī)程中的檢測樣品包括：在種蛋孵化出殼時，技術(shù)人員采集所有雛雞胎糞；在育雛后期，采集所有雞的血液；在開產(chǎn)初期和留種前，采集所有雞的血液和公雞精液。
“由于種蛋出殼時的雛雞*易感染病毒，病毒可能會橫向感染其他剛出殼的雛雞，想徹底清除病毒樣本必須檢測胎糞。”趙鵬表示，除此之外，還因為“胎糞檢測結(jié)果不僅可以反映這只雞的感染狀態(tài)，還能盡量減少對雛雞的應(yīng)激。從雞出殼8至10周齡時為育雛期，這個時期需要較高的溫度和營養(yǎng)，要飼養(yǎng)在專門的育雛舍中，應(yīng)激反應(yīng)越小越好?！?/span>
*后，為了防止漏檢，在種雞育雛后期由育雛舍轉(zhuǎn)入育成舍時還要檢測，不把病毒帶入新雞舍，在開產(chǎn)初期和留種前，也就是雞要“生孩子”時再進行*后把關(guān)。
打破誤區(qū)，做到“不留死角”
此前國際禽病界和家禽育種公司一直認為由于精子的自我校正機制等原因，禽白血病病毒并不感染精子，而公雞和母雞直接接觸才會傳染，認為在生產(chǎn)中普遍采用人工授精的方式，不會造成禽白血病的感染。“我們證明了種公雞可經(jīng)精液將病毒傳染給母雞，并由此垂直傳播至下一代?！壁w鵬說。
“在實施禽白血病凈化過程中發(fā)現(xiàn)，用感染禽白血病的公雞精液為正常母雞人工授精后，其后代群體中仍有禽白血病感染現(xiàn)象的發(fā)生?！贝拗沃姓f，由此我們開始懷疑公雞的精液是否也會將禽白血病病毒傳染給母雞？
一系列試驗立刻進行，通過給雞胚靜脈接種J病毒，待其孵化后找到感染病毒的公雞，再等它們性成熟后采集精液給母雞做人工授精，*后檢測母雞是否感染，并將該母雞產(chǎn)的蛋孵化小雞，對其進行病毒分離，結(jié)果顯示，這種方式孵化出的小雞體內(nèi)也可以檢測出禽白血病病毒?！熬褐械某煞质呛軓?fù)雜的，精子只是其中一小部分，精子不感染病毒不代表精液中沒有病毒?！壁w鵬表示，試驗數(shù)據(jù)證實了他們的懷疑是正確的，并進一步挖掘出新的“真相”：公雞即使血液中沒有檢測到禽白血病病毒，但精液中卻仍可以檢測到這個病毒。新出爐的對公雞精液實施病毒分離檢測的*佳操作流程在眾多雞禽類企業(yè)試驗后，數(shù)據(jù)顯示雞群的禽白血病感染率進一步下降。
“過去國際上一直忽略公雞在禽白血病傳播中的作用，漏檢了很多帶病種公雞，所以西方國家需用7至10年甚至更長的時間才能完成凈化。而運用了新技術(shù)，只需3至5年就能徹底凈化原種雞場內(nèi)的禽白血病毒?！壁w鵬表示。
這也讓國內(nèi)原種雞群禽白血病病毒凈化“不留死角”。
